Dreidimensionale Rekonstruktion solider Tumoren: Morphologische Evidenz für Tumorheterogenität

Hintergrund In der histopathologischen Routinediagnostik werden dreidimensionale Gewebeproben meist aufgrund des hohen Zeitaufwandes und mangelnder Möglichkeiten der Digitalisierung in zweidimensionalen Schnittebenen histo- und/oder immunhistochemisch analysiert. Fragestellung Wir demonstrieren hier die Anwendung der dreidimensionalen Rekonstruktion an soliden Tumoren und analysieren die inter-/intratumorale Heterogenität mit Bezug auf die epithelial-mesenchymale Transition (EMT). Material und Methoden Gewebeproben von Pankreas‑, Lungen‑, Kolorektal- und Mammakarzinomen sowie kolorektalen Lebermetastasen wurden seriell in Schnitten zu je 4 μm aufgearbeitet. Es wurden alternierende Färbungen (Zytokeratin AE1/3, „zinc finger E‑box-binding homeobox 1“ [ZEB 1], eCadherin) durchgeführt. Anschließend wurden die Tumorzellen bezügliche ihrer Morphologie (epitheloid amöboid, mesenchymal) und der Expression von ZEB 1 und eCadherin analysiert. Zur statistischen Analyse wurden alle Tumorzellverbände hierarchisch annotiert und analysiert. Ergebnisse Tumorbuds sind überwiegend mit der Haupttumormasse verbunden. Weiterhin konnte ein „shutteling“ von eCadherin innerhalb von Tumorzellverbänden < 9 Zellen beobachtet werden. ZEB 1 wird erst in Tumorzellverbänden ≤ 5 Zellen vermehrt exprimiert. Schlussfolgerungen Das initiale Tumorbudding und das anschließende Abkoppeln des Tumorbuds von der Haupttumormasse ist höchstwahrscheinlich ein in zwei Abschnitte geteilter Prozess. Die EMT ist jedoch innerhalb der von der Haupttumormasse losgelösten Tumorbuds statistisch nicht signifikant erhöht. Es konnte gezeigt werden, dass die aktuell gültige Definition eines Tumorbuds als Zellverbund von ≤5 Zellen sich nicht vollständig in das mittels eCadherin und ZEB1 dargestellte Konzept der EMT einordnen lässt.